CCK-8檢測試劑盒的工作原理基于WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽)在細胞內被脫氫酶還原成橙黃色甲臢產物的過程。細胞增殖越多越快,則脫氫酶還原生成的甲臢產物越多,顏色越深;細胞毒性越大,則細胞死亡越多,顏色越淺。因此,可以通過測定顏色深淺來判斷細胞活力或增殖、毒性狀態。CCK-8檢測試劑盒廣泛應用于生物學、醫學、藥學等領域的研究中,如細胞增殖實驗、藥物篩選、細胞毒性評估等。
CCK-8檢測試劑盒使用步驟:
準備細胞:將待檢測的細胞培養至適當密度。
加入CCK-8溶液:按照說明書要求的比例向細胞培養液中加入CCK-8溶液。
孵育:將加入CCK-8溶液的細胞培養板置于適當溫度(如37℃)下孵育一定時間(如1-4小時)。
測定OD值:使用酶標儀在450nm波長下測定各孔的OD值。
注意事項
操作規范:在使用CCK-8檢測試劑盒時,應嚴格按照說明書操作,避免污染和誤操作。
細胞狀態:細胞的狀態和密度對實驗結果有重要影響,因此在進行實驗前要確保細胞處于良好的生長狀態。
孵育條件:孵育溫度和時間對實驗結果也有影響,應嚴格按照說明書要求的條件進行孵育。
讀數準確性:使用酶標儀測定OD值時,應確保讀數準確,避免誤差對實驗結果的影響。